在生命科学研究领域,体外转录技术正以蓬勃之势快速发展,成为众多科研项目及生物制药研发的关键技术支撑。在体外转录的复杂体系中,RNA聚合酶堪称核心“主角”,其以DNA为模板催化合成互补RNA分子的功能至关重要。T7、T3与SP6 RNA聚合酶均为常用工具酶,其中T7 RNA聚合酶因具备高效的转录产能优势,被广泛应用于各类体外转录场景。而SP6 RNA聚合酶由于高度SP6启动子序列识别特异性,在精准转录方面展现出独特优势,其与T7 RNA聚合酶形成功能互补,共同为不同科研需求提供差异化解决方案。
图1. SP6 RNA Polymerase体外转录流程图[1]
SP6 RNA聚合酶是一种DNA依赖型的5'→3' RNA聚合酶,它能够高度特异性地识别SP6启动子序列,仅以SP6启动子下游的DNA为模板,高效催化单链或双链DNA SP6启动子下游NTP(核苷酸三磷酸)的掺入,从而合成与模板DNA互补的RNA链。不仅如此,它还能兼容如生物素标记、荧光素标记等修饰的NTP,为多样化标记RNA的合成提供了可能。凭借自身的特性,SP6 RNA聚合酶在科研与生物技术领域大显身手,广泛应用于以下场景:
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制备放射性标记的RNA探针
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体外转录制备mRNA疫苗
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制备基因编辑向导RNA
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制备siRNA、miRNA等小RNA
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合成RNA反义链,用于调控基因表达研究
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用于结构、加工和催化性能研究的RNA
翌圣生物全新推出的SP6 RNA聚合酶,具有高效转录活性,且该产品经过严格的质量控制,无内切或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染,确保实验结果不受干扰。
性能展示
翌圣SP6 RNA Polymerase (Cat#14810)
高效转录:体外转录效果媲美进口品牌
图2. 翌圣SP6 RNA Polymerase与进口品牌同类产品SP6 RNA Polymerase以带有SP6 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行体外转录时的效果图
注:分别添加不同酶活SP6 RNA Polymerase与0.1 μg带有SP6 Promoter的线性化质粒DNA为模板进行体外转录,37℃孵育2h,70℃孵育10min终止反应,加入2U DNase I (10325ES),37℃孵育15min消化模板DNA,得到的RNA转录产物为248 nt。取出10 μL反应产物,加入5μL 2 × RNA Loading Buffer,70℃变性10min,然后进行1%琼脂糖凝胶电泳,用1X TAE作为电泳液,160V电泳20min,染色后拍照观察结果。
无核酸外切酶、切口酶、非特异性核酸酶、RNase酶残留
图3. 翌圣SP6 RNA Polymerase核酸外切酶、切口酶、非特异性核酸酶、RNase残留检测结果
注:将SP6 RNA Polymerase分别与核酸底物孵育,并通过琼脂糖凝胶电泳分析谱带变化。实验结果表明,翌圣的3个批次SP6 RNA Polymerase均未检测出核酸外切酶(100 U)、切口酶(100 U)、非特异性核酸酶(100 U)或RNase(20U)残留,为您的实验结果准确性与可靠性保驾护航。
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产品名称 |
货号 |
规格 |
目录价 |
活动价 |
SP6 RNA Polymerase (20 U/μL) |
14810ES84 |
2000 U |
439元 |
0元 |
活动细则:
1、活动时间:即日起-7月30日;
2、活动名额有限,每位客户限一套。
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SP6 RNA聚合酶 |
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14810ES |
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10628ES |
参考文献:
[1]Karikó K. Developing mRNA for therapy[J]. The Keio Journal of Medicine, 2022, 71(1): 31-31.
[2]Krieg P A, Melton D A. [25] In vitro RNA synthesis with SP6 RNA polymerase[M]//Methods in enzymology. Academic Press, 1987, 155: 397-415.